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小鼠ELISA試劑盒的樣本兼容性指的是該試劑盒能夠有效檢測和分析的小鼠樣本類型。通常,這些樣本包括血清、血漿、細胞培養上清液以及其他生物液體。確保樣本兼容性是實驗成功的關鍵,因為它直接影響到檢測的準確性和重復性。
小鼠ELISA試劑盒的樣本兼容性主要取決于試劑盒的設計目標和檢測原理,以下是綜合多個研究結果的詳細分析:
一、樣本類型兼容性
1、?血清/血漿樣本?
多數小鼠ELISA試劑盒(如IgE檢測試劑盒)明確支持血清和血漿樣本,但需注意抗凝劑選擇(如EDTA、肝素等)可能影響檢測結果。例如豬圓環病毒2型抗體檢測試劑盒已驗證對小鼠血清樣本的適用性。
2、?細胞培養上清液?
部分試劑盒(如IL-8檢測試劑盒)優化了細胞上清液的檢測方案,但需注意樣本中可能存在的細胞碎片或培養基成分干擾。建議通過離心(3000×g,10分鐘)去除顆粒物。
3、?組織勻漿液?
需確認試劑盒是否提供組織裂解緩沖液配方,如β-內酰胺酶殘留檢測試劑盒適用于牛乳樣本,但未明確支持組織樣本。
二、樣本參數與試劑盒的匹配要求
樣本的體積、濃度范圍及稀釋比例需與試劑盒參數匹配,以避免超出檢測線性范圍或樣本量不足。
1、關鍵參數匹配要點
l 樣本體積:
Csf1r試劑盒需100μL/孔1,IL-17試劑盒未明確體積但強調“微量樣本適用",珍貴樣本建議選擇≤50μL/孔的試劑盒。
l 檢測范圍與稀釋驗證:
Csf1r試劑盒校準范圍62.5–4000 pg/mL,高濃度樣本需稀釋1:1001;
IL-17試劑盒檢測范圍4.685–300 pg/mL,低至2.34 pg/mL仍可檢出;
l 通用原則:
樣本濃度需落在試劑盒線性范圍內,高濃度樣本需梯度稀釋驗證(推薦3個稀釋度,回收率85%–115%)。
三、樣本處理要求
1、?保存條件
短期保存:2-8℃可保存3-5天(如禽白血病ELISA試劑盒)。
長期保存:-20℃或-80℃避免反復凍融(批內變異系數需<10%)。
2、?稀釋要求?
高濃度樣本需按說明書稀釋,如小鼠IgE檢測試劑盒線性范圍為0.375-12μg/mL,超出范圍需稀釋后復測。
四、種屬來源的兼容性
如果樣本來源于非經典模型生物,則可能需要考慮試劑盒是否具有種屬交叉反應性,或者是否經過驗證可用于該物種。建議查看試劑盒的技術參數中是否提供種屬交叉反應數據。
五、樣本量需求
不同的ELISA試劑盒對樣本量的需求不同,一般而言,商業化試劑盒的樣品用量通常在10μL至100μL之間。如果樣本較為珍貴或難以獲取,可以選擇對樣本用量要求較低的試劑盒。
五、預處理要求
了解試劑盒是否需要對樣本進行特定的預處理,如稀釋或使用特定的樣本稀釋液。使用與試劑盒推薦相匹配的稀釋液可以減少基質效應,提高檢測的準確性。
綜上所述,在選擇小鼠ELISA試劑盒時,樣本兼容性是一個不可忽視的因素,應當綜合考慮樣本類型、樣本參數、種屬來源、樣本處理要求、種屬來源及樣本預處理等多個方面,以確保所選試劑盒能夠滿足實驗需求并獲得可靠的結果。?
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