MGB探針有哪些純化方式？

MGB探針（Minor Groove Binder探針）的純化通常采用高效液相色譜（HPLC）方法，具體來說是C18反相柱分離。這種純化技術能夠有效去除合成過程中產(chǎn)生的截短產(chǎn)物和鹽分，確保探針的高純度。MGB探針的純化方式主要基于高效液相色譜（HPLC）技術，具體方法及特點如下：

一、核心純化方法

1、?HPLC純化

標準HPLC純化可去除未完整合成的探針片段及雜質(zhì)，適用于常規(guī)實驗需求。

純度通常達80-90%，成本較低，但可能殘留微量截斷序列。

2、?HPLC_CE (IVD)純化

專為診斷級應用優(yōu)化，通過毛細管電泳（CE）進一步分離，純度提升至95%以上。

可避免外源性污染，符合ISO13485認證要求，適用于臨床檢測試劑生產(chǎn)。

二、輔助純化技術

1、?乙醇沉淀法?：適用于長度＞18 nt的探針，通過反復沉淀去除小分子雜質(zhì)（如dNTP）。

2、?凝膠過濾層析?：使用Sephadex G-50等基質(zhì)分離大分子探針與小分子污染物。

3、毛細管電泳（CE）純化?

部分技術方案結合HPLC與CE（標記為HPLC_CE）進行純化，尤其適用于IVD（體外診斷）級探針，可進一步降低外源性污染風險。例如，某些廠商提供專門優(yōu)化的HPLC_CE(IVD)純化服務，以滿足高靈敏度檢測需求。

三、選擇建議

1、普通PCR實驗：優(yōu)先C18脫鹽柱或OPC純化（35mer以下），平衡成本與效率。

2、長片段Oligo探針：采用PAGE純化，通過電泳分離去除短片段雜質(zhì)。

3、高純度需求?：優(yōu)先選擇HPLC或HPLC_CE組合，尤其適用于SNP分型等精密檢測?。

4、?成本敏感場景?：可考慮標準HPLC或凝膠過濾層析，但需驗證純度是否符合實驗要求。

綜上，MGB探針必須使用HPLC純化以確保實驗準確性，尤其適用于對靈敏度和特異性要求高的場景。若為成本敏感型普通PCR實驗，可選擇C18脫鹽或OPC等經(jīng)濟型方式，但MGB探針無替代方案。