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離心是集中作用于所有不同密度粒子的自然力以加速自然分離過程的過程。它是通過試管中的密度來分離顆粒的??梢允褂眠^濾或沉降方法進行離心。離心分離的核心是通過沉降分離。較密集的顆粒沉入容器底部,而較輕的顆粒保持懸浮。離心將置換密度甚至略有不同的顆粒,并受以下四個因素的影響:樣品和溶液的密度,溫度和粘度,粒子位移的距離,旋轉速度。
離心機種類
常溫離心機:占地面積小,離心期間樣品溫度會因摩擦生熱而上升。
冷凍離心機:后面或側面裝有壓縮機以進行主動冷卻,占地面積比非冷凍型大,在離心結束后不會自動打開離心機蓋,根據不同的壓縮機性能,可以在不同時間內將離心機冷卻至所需溫度。也可在長時間高速離心后仍保持設定溫度。
升溫型離心機: 部分特殊型號的離心機有加熱功能,可以主動給樣品加熱,保證樣品活性和質量。
不同的樣品分離時所需離心力不同,因此根據相對離心力大小可以將離心機分為低速離心機(≤6000r/min)、高速離心機(≤25000r/min)、超高速離心機(≥30000r/min)。低速離心機:當物料的粒徑在1微米到50微米之間時,可以用低速離心機進行分離。通常用于細胞或者血液離心,離心力在幾百到幾千不等。
高速離心機:能達到的離心力在 10,000 ~30,000 × g 。分子生物學實驗的離心力范圍是 14,000 - 20,000 × g,病毒和細胞器的離心分離等應用需要 30,000 × g 的離心力。高速離心對離心管品質有較高要求。蛋白、核糖體、細菌溶解產物、病毒等物質的離心分離以及質譜用樣品的制備,建議使用可耐受高離心力的離心管。分離直徑約0.1~1微米的動植物組織中的病毒等物質時,推薦使用轉速為10000~20000轉,離心力約10000轉的高速冷凍離心機。
超速離心機:離心力達到 30,000 × g 以上。通常需要配備特殊的轉子或者離心管來實現高速和高離心力。分離直徑約0.002~0.1微米的各種蛋白質、DNA、RNA等成分時,需要超速離心機,轉速在40000轉/分以上,離心力要達到100000g~400000g。根據離心機的大小,可放在工作臺上的稱為臺式離心機,可放在地面上的稱為落地式離心機。
落地式離心機:至少需要 1 平米的占地面積,可以節約實驗臺面空間,主要用于高速或大容量離心
臺式離心機: 臺式離心機有多種規格尺寸。根據尺寸分為以下2 類:多功能離心機:離心腔體大、轉子種類多。并提供多種規格和類型的適配器可供選擇。可耐受離心力主要取決于離心耗材的性能。
小型離心機:適用于微量離心管,占地面積小, 離心力為14,000 - 30,000 × g,最多可以離心 48 個 1.5/2.0 mL 微量離心管。部分型號還可以離心 15/50 mL 離心管或者 SBS 標準規格的工作板。一般均提供冷凍和常溫兩種版本。
離心原理
在離心力作用下,混合物質由于密度差異而沉積分離。離心時間由物質的密度和施加的離心力決定:密度越大,越快沉降到達管底 ( 密度 = 質量 / 體積 )離心力越大,離心分離時間越短離心分離按照應用可分為離心沉降和離心過濾兩種
離心沉降利用懸浮液(或乳濁液)密度不同的各組分在離心力場中迅速沉降分層的原理,實現液 - 固或液 - 液 ( 相 ) 分離。日常實驗應用有沉淀離心、密度梯度離心、等密度梯度離心等。
沉淀離心是離心機見的應用,即通過離心使固體集聚沉淀在離心管底部從而與液體 ( 上清液 ) 分開。在相分離的過程中,溶質從分散狀態或者溶液介質中轉移到另外一種溶劑中 ( 來進行化學 / 分子生物學分析 )。
等密度梯度離心是指在離心力場下,在密度梯度介質中,顆粒移動到與它們各自的密度恰好相等的位置,形成一系列密度區,從而使不同密度的物質得到分離。
離心過濾使懸浮液在離心力場下產生的離心壓力,作用在過濾介質上,使液體通過過濾介質成為濾液,而固體顆粒被截留在過濾介質表面,從而實現液 - 固分離。例如超濾膜離心分離純化大分子物。
離心不配平會怎么樣?
1.損壞機器 在離心過程中,如果兩個物體的重量不均等,很容易引發劇烈的震動。當離心機工作時,如果未能準確地進行配平,轉軸會因受到不均勻的力而遭到磨損。長時間下來,這種磨損會變得更加嚴重,從而縮短離心機的使用壽命。若不平衡情況嚴重,可能導致離心機發生嚴重損壞,而離心機的維修及更換成本相對較高,經濟負擔較重。
2.威脅人身安全 由于不平衡導致的偏差過大會直接對離心機造成損害,也對操作人員構成極大的風險。例如,在高速運轉狀態下,若轉子因不平衡而脫離腔體,其高速旋轉產生的動能可能會導致嚴重的破壞。這種情況不僅可能損壞實驗設備,還可能對周圍人員的生命安全構成威脅。因此,操作人員應嚴格遵循離心機的操作規程,確保樣品的正確配平,以防止意外事故的發生。良好的配平是離心機運行的前提條件,務必定期維護和檢查設備,遵循標準操作程序,確保實驗的安全性和儀器的使用壽命。
如何配平?
1.樣品管內溶液質量相等
為了使離心機在運行時保持平衡,務必確保樣品管內所裝溶液的質量相等。當僅需要離心一個樣品管時,需在轉子的對稱位置放置一個裝有相等質量清水的管子,以確保轉子的平衡性。這種做法不僅有助于穩定離心機的運轉,還能夠減少因不平衡導致的設備磨損。
2.樣品管對稱放置
樣品管必須以中心對稱的方式進行放置,以確保離心機的平衡。無論使用固定角轉頭還是水平轉頭,這一原則都適用。對于固定角轉頭,樣品管應放置在以中心點對稱的兩個相對端;而對于水平轉頭,則需將樣品管放置在軸對稱的兩個離心孔中。通過正確的對稱放置,可以有效降低轉子因不平衡所引發的震動,保障離心機的安全和有效運
3.12孔固定角轉子配平

4.24孔固定角轉子配平

5.4X14孔水平吊藍轉子配平

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