[ELISA實驗必看]如何設(shè)定實驗中的陰性、陽性和空白對照

用稀釋液代替檢測樣本、用以觀測zui終反應(yīng)的顯色“本底”、并用于酶標(biāo)儀消除、扣除“本底”，即：以本底為“零”讀取陽性、陰性對照孔和樣本檢測孔的吸光值（A）；或者，在計算陰性對照均值（NCx）、陽性對照均值（PCx）、樣本讀數(shù)的S/C.O.值時減去空白對照的本底吸光值。

陰性對照，應(yīng)當(dāng)是本項檢測試驗中采用與待撿物具有同源性和同質(zhì)性，又不含有待檢物質(zhì)，并能客觀比較和鑒別處理因素（血清免疫學(xué)試驗中有特異性抗原與抗體反應(yīng)）之間的差異。　陰性對照的基本組成也應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，先行檢測確定其中不含待檢物質(zhì)。比如，檢測人血清標(biāo)本時，陰性陽性對照同陰性對照，只是采用“精選”的含有待檢物質(zhì)的人血清制備而成。所謂“精選”，就是把收集的陽性人血清經(jīng)過數(shù)種試驗進行“篩試”、把含有“干擾性物質(zhì)”的血清剔除、不用，以避免出現(xiàn)“假陽性”干擾試驗結(jié)果。   

陽性對照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，一般陽性對照多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。比如，以人血清為標(biāo)本的測定，陽性對照多用確定的病人血清或者以復(fù)鈣人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品。