豬細胞系是否污染的判斷方法

細胞系污染是細胞培養中常見的問題，尤其是在長期培養或跨實驗室傳遞過程中，容易引入污染源，如細菌、真菌、HeLa細胞等。豬細胞系也不例外，若發生污染，可能影響實驗結果甚至導致研究失敗。因此，判斷細胞是否污染是科研實驗中不能缺少的一環。

判斷豬細胞系是否污染，可以參考以下幾種方法：

一、肉眼觀察：

1、培養基顏色：正常情況下，培養基顏色應為紅色或粉色。如果出現橙色、黃色或培養基變渾濁，可能表明污染。

2、細胞瓶身：檢查是否有裂縫，裂縫可能意味著污染。

二、顯微鏡檢查：

1、細菌污染：顯微鏡下可見細小顆粒，如桿菌或球菌，培養基可能很快變黃且渾濁。

2、真菌污染：觀察到菌絲、霉斑或卵圓形散在細胞周邊和細胞之間，真菌生長較慢，但一旦發現，污染嚴重。

3、支原體污染：細胞生長變慢，可能出現小黑點，但培養基通常不發生渾濁。

4、細胞交叉污染：顯微鏡下細胞形態明顯不同，計數時細胞直徑有差異。

5、黑膠蟲污染：20X顯微鏡下可見細胞間隙有小黑點，會蠕動。

三、STR/SNP鑒定：

STR是細胞鑒定的“金標準"，可與quanwei數據庫比對，確認是否發生交叉污染。

四、DNA條形碼技術：

適用于確認細胞是否為豬源，避免其他物種污染。

五、實驗記錄和比對：

對比正常細胞的生長曲線、形態和培養基顏色，發現異常變化。

六、實驗室環境管理：

保持實驗室環境整潔，個人衛生，減少污染風險。

七、參考標準數據庫：

與ATCC、DSMZ等數據庫比對STR數據，確認細胞系身份。

八、注意事項

?定期檢測?：建議每2-3周進行支原體檢測，尤其是長期培養的細胞系。

?污染處理?：確認污染后需立即丟棄培養物，并對培養箱、器材chedi消毒。

九、結論與建議

1、優先使用STR基因分型進行細胞身份驗證，是目前zui可靠的方法。

2、結合肉眼和顯微鏡觀察作為初步篩查手段。

3、定期進行細胞鑒定，特別是在實驗前后和細胞傳代較多時。